Revvity, 63ADK016PEH, Kit de detección de HTRF Phospho-IR-β (receptor de insulina β) (Tyr1150/1151), 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo del receptor de fosfoinsulina beta (Tyr1150/1151) permite detectar la fosforilación de Tyr1150/1151 en el receptor de insulina beta. Estimulado por la insulina y los factores de crecimiento similares a la insulina, el receptor de insulina participa en diversas vías, como las de señalización de la insulina y FoxO.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo del receptor de fosfoinsulina ß (Tyr1150/1151)
El ensayo del Receptor de Fosfo-Insulina-beta (Tyr1150/1151) mide el Receptor de Insulina-beta cuando se fosforila en Tyr1150/1151. A diferencia del Western Blot, el ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo del Receptor de Fosfo-Insulina-beta (Tyr1150/1151) utiliza dos anticuerpos marcados: uno con un fluoróforo donante y el otro con un aceptor. El primer anticuerpo se selecciona por su unión específica al motivo fosforilado de la proteína, y el segundo por su capacidad de reconocer la proteína independientemente de su estado de fosforilación. La fosforilación de la proteína permite la formación de un inmunocomplejo que involucra a ambos anticuerpos marcados y que acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de proteína fosforilada presente en la muestra y proporciona un medio para evaluar el estado de fosforilación de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de 2 placas del receptor de fosfoinsulina ß (Tyr1150/1151)
El protocolo de 2 placas implica el cultivo celular en una placa de 96 pocillos antes de la lisis. Posteriormente, se transfieren los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección HTRF Phospho-IR-beta (Tyr1150/1151). Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa del receptor de fosfoinsulina ß (Tyr1150/1151)
La detección de IR-beta fosforilado (Tyr1150/1151) con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Modificación molecular-fosforilación
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Metabolismo/Neurociencia de la diabetes
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo