Revvity, 64AAV2PEH, kit de detección de AAV2 HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
Los vectores de virus adenoasociados (AA) son la plataforma líder para la administración génica en el tratamiento de diversas enfermedades humanas. El serotipo 2 de AAV (AAV2) fue uno de los primeros serotipos de AAV estudiados y utilizados como vectores para un tropismo específico y natural hacia tipos celulares específicos, como neuronas y hepatocitos, o tejidos como el músculo esquelético y la retina. El kit AAV2 está diseñado para detectar y cuantificar partículas de AAV2 en un formato fácil de usar y sin lavado. Este procedimiento, sencillo y robusto, ofrece un mayor rendimiento en comparación con el método ELISA.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo de la cápside de AAV2
El ensayo del virus adenoasociado serotipo 1 (AAV2) mide la cápside de AAV2 en el sobrenadante celular o lisado celular. El ensayo utiliza dos anticuerpos anti-AAV2: uno acoplado a HRP, que se une al anti-HRP d2 (aceptor) en la premezcla 1, y el otro acoplado a biotina, que se une al Eu-criptato de estreptavidina (donante) en la premezcla 2. En presencia de la cápside de AAV2 en un extracto celular o sobrenadante, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la cápside presente en la muestra y permite evaluar cualquier cambio causado por la variabilidad experimental en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de la cápside de AAV2
El protocolo del ensayo de cápside de AAV2, que utiliza una placa blanca de pequeño volumen de 384 pocillos, se describe a la derecha. Se dispensan 5 µL de muestra o estándar y 5 µL de diluyente directamente en la placa para su detección con reactivos HTRF®. El anticuerpo anti-AAV2 con biotina se premezcla con estreptavidina marcada con el donante, y el anticuerpo anti-AAV2 con HRP se premezcla con anti-HRP marcado con el aceptor. Se añadieron 5 µL de cada premezcla. El ensayo puede ejecutarse en un formato de hasta 1536 pocillos simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido. Aplicación: Bioprocesamiento
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2, tampón de lisis 3, tampón de lisis 4
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: partículas virales
Tecnología-TR-FRET
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo