Revvity, 64AAV5PEH, kit de detección de AAV5 HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
Los vectores de virus adenoasociados (AA) son la plataforma líder para la administración génica en el tratamiento de diversas enfermedades humanas. El serotipo 5 del virus adenoasociado (AAV5) se ha caracterizado consistentemente como el serotipo con menor seroprevalencia y mínima reactividad cruzada contra anticuerpos neutralizantes preexistentes, lo que puede ser una ventaja para su uso como vector en la terapia génica de la hemofilia A y enfermedades asociadas con su tropismo tisular natural, como las células de pulmón, retina o sistema nervioso central. El kit AAV5 está diseñado para detectar y cuantificar partículas de AAV5 en un formato fácil de usar y sin lavado. Este procedimiento, sencillo y robusto, se beneficia de un mayor rendimiento en comparación con el método ELISA.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo de cápside AAV5
El ensayo del virus adenoasociado serotipo 5 (AAV5) mide la cápside de AAV5 en el sobrenadante celular o lisado celular. El ensayo utiliza dos anticuerpos anti-AAV5: uno marcado con d2 (aceptor) y el otro contra biotina, que se une al criptato de estreptavidina Eu (donante) en una premezcla. En presencia de la cápside de AAV5 en un extracto celular o sobrenadante, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la cápside presente en la muestra y permite evaluar cualquier cambio causado por la variabilidad experimental en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de la cápside del AAV5
El protocolo del ensayo de la cápside de AAV5, que utiliza una placa blanca de pequeño volumen de 384 pocillos, se describe a la derecha. Se dispensan 5 µL de muestra o estándar y 5 µL de diluyente directamente en la placa de detección para su detección con reactivos HTRF®. El anticuerpo anti-AAV5 con biotina se premezcló con estreptavidina marcada con donante antes de añadirlo. El ensayo puede ejecutarse en un formato de hasta 1536 pocillos simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido. Aplicación: Bioprocesamiento
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2, tampón de lisis 3, tampón de lisis 4
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: partículas virales
Tecnología-TR-FRET
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo