Revvity, 64ADAR1TPEH, kit de detección de ADAR1 total humano HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
ADAR1 es una de las dos enzimas codificadas por el gen ADAR. Se une al ARN bicatenario (ARNdc) y desamina su adenosina en inosina (hipoxantina). Las proteínas ADAR actúan postranscripcionalmente para alterar el contenido de nucleótidos del ARN. La desaminación que realizan interfiere con el emparejamiento A:U habitual y desestabiliza el ARN.
La pérdida de regulación de ADAR1 y ADAR2 está implicada en el desarrollo y la progresión de múltiples cánceres, como glioblastomas, melanomas o leucemias agudas. Además de su papel en la oncogénesis, se sospecha que las enzimas ADAR contribuyen al agravamiento de algunas enfermedades infecciosas como el VIH y el sarampión, así como de trastornos mentales como la depresión, la epilepsia y la esquizofrenia.
Cómo funciona
Principio del ensayo de ATG16L1 total
El ensayo HTRF Total-ATG16L1 cuantifica el nivel de expresión de ATG16L1 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total-ATG16L1 utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de ATG16L1 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas para Total-ATG16L1
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen (HTRF 384-lv o 96-lv) antes de añadir los reactivos de detección HTRF Total ADAR1. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa para Total-ATG16L1
La detección de ADAR1 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2, tampón de lisis 3
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo