Revvity, 64ANDRPEG, kit de detección del receptor de andrógenos humano HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo de detección del receptor de andrógenos humano HTRF monitorea el receptor de andrógenos de tipo salvaje (AR-WT) y la variante de empalme del receptor de andrógenos 7 (AR-V7), y se utiliza para detectar la expresión de receptores de andrógenos endógenos o sobreexpresados ​​en varias células.
El receptor de andrógenos es un tipo de receptor nuclear que se activa por las hormonas andrógenas, como la testosterona (T) y la dihidrotestosterona (DHT).
Los andrógenos se unen al dominio de unión al ligando del receptor de andrógenos, lo que resulta en la homodimerización del receptor y la translocación al núcleo. Esto activa la expresión génica descendente y la activación de las vías de señalización, como la vía PI3K/AKT. La expresión génica inducida por el receptor de andrógenos resulta en la división celular, proliferación, diferenciación, apoptosis y angiogénesis. Una desregulación de la vía del receptor de andrógenos podría conducir a fenotipos oncogénicos, y la activación o supraexpresión del receptor de andrógenos se ha vinculado ampliamente al cáncer de próstata, así como a otros tipos de cáncer, como el cáncer de mama y el glioblastoma. Además, las variantes del receptor de andrógenos se expresan en varias líneas celulares de cáncer humano. La variante 7 del receptor de andrógenos (AR-V7), una variante de empalme del ARNm del receptor de andrógenos que resulta en el truncamiento del dominio de unión al ligando, es constitutivamente activa y se expresa ampliamente en líneas celulares de cáncer humano. Por lo tanto, el receptor de andrógenos se ha convertido en una diana farmacológica importante para la industria farmacéutica. El desarrollo de compuestos PROTAC para combatir la degradación del receptor de andrógenos forma parte de la estrategia terapéutica dirigida a los cánceres con receptores de andrógenos positivos.
Cómo funciona
Principio del ensayo del receptor de andrógenos humanos HTRF
El ensayo HTRF del Receptor de Andrógenos Humano cuantifica el nivel de expresión del Receptor de Andrógenos en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, el ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo del Receptor de Andrógenos Humano utiliza dos anticuerpos marcados: uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia del Receptor de Andrógenos en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas del receptor de andrógenos humanos
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección del receptor de andrógenos humano HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa del receptor de andrógenos humanos
La detección del receptor de andrógenos humano con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Compatible con automatización: Sí
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 2, tampón de lisis 3
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo