Revvity, 64AP2TPEB, kit de detección de AP2 total en humanos y ratones HTRF, 1000 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo celular Total AP2 monitoriza la AP2 beta total y se utiliza para detectar la expresión de AP2 beta endógena o sobreexpresada en diversas células. Las AP2 beta son componentes del complejo de proteína adaptadora 2 (AP-2) y se conocen como proteínas de carga. Desempeñan diversas funciones en las células, incluyendo la internalización de GPCR mediante un proceso de endocitosis dependiente de clatrina por interacción directa con arrestinas beta. Las concentraciones del ion AP2 beta causan una atenuación específica de las respuestas celulares a estímulos como hormonas, neurotransmisores o señales sensoriales. Dado que la AP2 se encuentra en diversos tejidos, se cree que podría desempeñar un papel importante en muchos cánceres u otras enfermedades humanas (diabetes) al inhibir la actividad mediada por receptores.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo AP2 total
El ensayo Total AP2 cuantifica el nivel de expresión de AP2 beta en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total AP2 utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de AP2 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de AP2 total
La detección de AP2 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta.

Protocolo de ensayo de una placa de AP2 total
La detección de AP2 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica: Inflamación cardiovascular, metabolismo, diabetes, esteatohepatitis no alcohólica (EHNA) y fibrosis.
Tamaño de la unidad: 1000 puntos de ensayo