Revvity, 64ARFLPEH, kit de detección del receptor de andrógenos HTRF (mutante FL/AR-FL), 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo HTRF de detección del receptor androgénico humano de longitud completa monitoriza el receptor androgénico de tipo silvestre (AR-WT), es decir, de longitud completa (AR-FL). Se utiliza para detectar la expresión de AR-FL endógeno o sobreexpresado en diversas células.
El receptor de andrógenos es un receptor nuclear que se activa por las hormonas andrógenas, incluidas la testosterona (T) y la dihidrotestosterona (DHT).
Los andrógenos se unen al dominio de unión al ligando del receptor de andrógenos, lo que resulta en la homodimerización del receptor y su translocación al núcleo. La expresión génica y las vías de señalización posteriores se activan entonces, incluyendo la vía PI3K/AKT. La expresión génica inducida por el receptor de andrógenos promueve la división celular, la proliferación, la diferenciación, la apoptosis y la angiogénesis. La desregulación de la vía del receptor de andrógenos puede conducir a fenotipos oncogénicos, habiéndose vinculado la activación o subexpresión del receptor de andrógenos a enfermedades como el cáncer de próstata, el cáncer de mama, el glioblastoma y otras neoplasias malignas. Además, las variantes del receptor de andrógenos se expresan en diversas líneas celulares de cáncer humano. El desarrollo de compuestos PROTAC que se dirigen a la degradación del receptor de andrógenos es una estrategia terapéutica popular para dirigirse a los cánceres con receptores de andrógenos positivos.
Cómo funciona
Principio del ensayo del receptor de andrógenos de longitud completa humano HTRF

El ensayo HTRF del Receptor de Andrógenos Humano de Longitud Completa cuantifica el nivel de expresión del Receptor de Andrógenos en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, el ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo del Receptor de Andrógenos Humano de Longitud Completa utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia del Receptor de Andrógenos en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas para el receptor de andrógenos de longitud completa humano
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección del receptor de andrógenos de longitud completa humano HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa para el receptor de andrógenos de longitud completa humano
La detección del receptor androgénico humano de longitud completa con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Tecnología-TR-FRET
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo