Revvity, 64AT5TPEH, kit de detección de STAT5 total en humanos y ratones HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
Las proteínas Transductoras de Señales y Activadoras de la Transcripción (STAT) son una familia de siete factores de transcripción citoplasmáticos que transmiten señales provenientes de receptores de citocinas y factores de crecimiento de la superficie celular al núcleo. Las proteínas STAT controlan procesos celulares fundamentales, como la supervivencia celular, la proliferación, la diferenciación y la respuesta inmunitaria. La desregulación de la señalización de STAT5 está implicada en cánceres hematopoyéticos, donde promueve la supervivencia celular, la proliferación y la metástasis.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo Total STAT5
El ensayo Total STAT5 cuantifica el nivel de expresión de STAT5 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total STAT5 utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de STAT5 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de STAT5 total
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección HTRF Total STAT5. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa Total STAT5
La detección de STAT5 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, facilita la miniaturización, manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Tampón/Tampón de lisis de disolvente 4
Modalidad de detección-HTRF
Especie huésped: ratón humano
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Objetivo-STAT5
Clase objetivo: fosfoproteínas
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología de la inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo