Revvity, 64BDCRBNPEH, kit de unión a cereblon HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
Una forma rápida y sencilla de identificar nuevos aglutinantes para la proteína Cereblon WT.
Cereblon, también conocido como CRBN, participa en numerosos procesos biológicos y está estrechamente relacionado con la proliferación, la apoptosis, el metabolismo celular y la aparición de numerosas enfermedades. Cereblon es también una de las dos ligasas E3 más populares, reclutada por quimeras bifuncionales dirigidas a la proteólisis (PROTAC) para inducir la ubiquitinación y la posterior degradación proteasómica de una proteína diana. Cereblon interactúa con diversas proteínas para formar el complejo funcional de la ubiquitina ligasa E3, en el que CRBN funciona como receptor de sustrato del complejo de la ubiquitina ligasa E3 y dirige las proteínas a la proteólisis.
Por lo tanto, la identificación de nuevos ligandos de Cereblon es una forma de controlar los procesos biológicos implicados en enfermedades oncológicas, neurodegenerativas o metabólicas mediante la inducción de la degradación dependiente del proteasoma de proteínas no deseadas.
Cómo funciona
Principio del ensayo
El ensayo de unión HTRF a Cereblon es un formato de ensayo competitivo que utiliza rojo talidomida como ligando de Cereblon, una proteína Cereblon humana marcada con GST y un anticuerpo anti-GST marcado con criptato. Este compuesto compite con el rojo talidomida y, por lo tanto, impide la FRET.

Protocolo de ensayo
El ensayo de unión de Cereblon puede ejecutarse en una placa blanca de bajo volumen de 96 o 384 pocillos (20 µL final). Como se describe aquí, las muestras o estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo; a continuación, se añade la proteína Cereblon marcada con GST humana, seguida de la dispensación de los reactivos HTRF: el anticuerpo anti-GST marcado con criptato de europio y el rojo de talidomida marcado con XL665. Los reactivos marcados con fluoróforos HTRF pueden premezclarse y añadirse en un solo paso de dispensación. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido. Interacción entre la aplicación y la proteína.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Ensayo de unión de clase objetivo
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica-Inflamación Neurociencia Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo