Revvity, 64BDIAPB3PEG, kit de unión HTRF cIAP1B3, 500 puntos de ensayo

Descripción general
Una forma rápida y sencilla de identificar y caracterizar nuevos aglutinantes para la proteína cIAP1 dirigidos al dominio BIR3.
cIAP1, también llamada BIRC2, pertenece a la familia de las Proteínas Inhibidoras de la Apoptosis (IAP). Las proteínas IAP participan en múltiples procesos biológicos, como la inmunidad innata, y desempeñan un papel importante en la inhibición de la apoptosis.
La sobreexpresión de cIAP1 se ha asociado con la resistencia al cáncer, lo que la convierte en una diana atractiva en la terapia oncológica, donde se investigan diversas estrategias terapéuticas, como los miméticos de SMAC. Además, cIAP1 presenta actividad de ligasa E3 y conduce a la ubiquitinación de proteínas diana y su posterior degradación. Esta propiedad se aprovecha mediante la estrategia de quimeras dirigidas a la proteólisis (PROTAC). De hecho, las moléculas SNIPER (borradores de proteínas dependientes de inhibidores específicos y no genéticos de la proteína de apoptosis [IAP]) pueden inducir la degradación tanto de las proteínas diana como de los IAP, y se espera que potencien la destrucción de células cancerosas.
Por lo tanto, los nuevos compuestos dirigidos a cIAP1 que exhiben una doble función: i) inhibición de la función antiapoptótica de cIAP1 e ii) inducción de la degradación de proteínas dirigidas, representan un enfoque terapéutico prometedor.
cIAP1, al igual que otras proteínas de la familia IAP, contiene dominios BIR que interactúan con el motivo de unión a IAP de proteínas asociadas, como las caspasas. Se ha sugerido que esta interacción regula las actividades proapoptóticas y antiapoptóticas.
La caracterización de los compuestos cIAP1 en los dominios BIR2 y BIR3 permite realizar estudios precisos de perfiles y selectividad.
Cómo funciona
Principio del ensayo
El kit de unión HTRF cIAP1 BIR3 es un formato de ensayo competitivo que utiliza LCL161 - Ligando rojo como ligando cIAP1 BIR3, un dominio de unión cIAP1 BIR3 humano marcado con GST y un anticuerpo marcado con terbio anti-GST. Los compuestos de unión cIAP1 compiten con el ligando LCL161 - Rojo y, por lo tanto, evitan que se produzca FRET.

Protocolo de ensayo
El ensayo del dominio de unión cIAP1 BIR3 puede realizarse en una placa blanca de bajo volumen de 96 o 384 pocillos (20 µL final). Como se describe aquí, las muestras o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo. A continuación, se añade el dominio de unión cIAP1 BIR3 marcado con GST humano, seguido de la dispensación de los reactivos HTRF: el anticuerpo anti-GST marcado con criptato de terbio y el LCL161-Rojo marcado con d2. Los reactivos marcados con fluoróforos HTRF pueden premezclarse y añadirse en un solo paso de dispensación. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido. Interacción entre aplicaciones y proteínas.
Compatible con automatización: Sí
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Ensayo de unión de clase objetivo
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica-Inflamación Neurociencia Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo