Revvity, 64BDKRASGPEH, kit de unión HTRF KRAS G12C/GTP, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
Una forma rápida y sencilla de identificar nuevos competidores de KRAS G12C/GTP. KRAS es una pequeña GTPasa implicada en diversos procesos biológicos, como la proliferación, la supervivencia y el metabolismo celular. Se sabe que este protooncogén muta en muchos subtipos de cáncer, lo que induce una proliferación descontrolada y modificaciones del metabolismo celular. Por lo tanto, contribuye al efecto Warburg en las células cancerosas. Al igual que la mayoría de las pequeñas GTPasas, KRAS se une al GDP en su forma inactiva o al GTP para activarse. KRAS G12C es una de las formas mutantes más comunes en el cáncer, lo que conduce a un estado permanentemente activo de KRAS. La generación de nuevos competidores de KRAS/GTP es una estrategia relevante para los procesos biológicos implicados en el crecimiento del cáncer, al reducir la actividad de KRAS y las vías asociadas.
Cómo funciona
Principio del ensayo
El ensayo de unión a GTP de KRAS HTRF se presenta en un formato de ensayo competitivo que utiliza un reactivo GTP-Red como ligando de KRAS G12C, una proteína KRAS G12C humana marcada con 6His y un anticuerpo anti-6His marcado con criptato. El compuesto en estudio compite con el reactivo GTP Red y, por lo tanto, impide la FRET.

Protocolo de ensayo
El ensayo de unión de KRAS G12C humano puede realizarse en una placa blanca de bajo volumen de 96 o 384 pocillos (20 µL final). Como se describe aquí, las muestras o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo. A continuación, se añade la proteína KRAS G12C humana marcada con His, seguida de la dispensación de los reactivos HTRF: el anticuerpo anti-6His marcado con criptato de europio y el reactivo GTP-Red. Los reactivos marcados con fluoróforos HTRF pueden premezclarse y añadirse en un solo paso de dispensación. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido. Interacción entre la aplicación y la proteína.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 2 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Ensayo de unión de clase objetivo
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo