Revvity, 64BDKRASWPEH, kit de unión HTRF KRAS WT/GTP, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
Una forma rápida y sencilla de identificar nuevos competidores de KRAS WT/GTP. KRAS es una pequeña GTPasa implicada en diversos procesos biológicos, como la proliferación celular, la supervivencia celular y el metabolismo celular. Se sabe que este protooncogén muta en muchos subtipos de cáncer, lo que induce una proliferación descontrolada y modificaciones del metabolismo celular. Por lo tanto, contribuye al efecto Warburg en las células cancerosas. Al igual que la mayoría de las pequeñas GTPasas, KRAS se une al GDP en su forma inactiva o al GTP para cambiar a la forma activa. KRAS G12C es una de las formas mutantes más comunes en el cáncer, lo que conduce a un estado permanentemente activo de KRAS. Por lo tanto, la identificación de nuevos competidores de KRAS/GTP es una estrategia relevante para controlar los procesos biológicos implicados en el crecimiento del cáncer mediante la reducción de la actividad de KRAS y las vías asociadas.
Cómo funciona
Principio del ensayo
El ensayo de unión a GTP HTRF KRAS se realiza en un formato competitivo, utilizando un reactivo GTP-Red como ligando de KRAS WT, una proteína KRAS WT humana marcada con 6His y un anticuerpo anti-6His marcado con criptato. El compuesto en estudio compite con el reactivo GTP Red, impidiendo así la FRET.

Protocolo de ensayo
El ensayo de unión de KRAS WT humano puede ejecutarse en una placa blanca de bajo volumen de 96 o 384 pocillos (20 µL final). Como se describe aquí, las muestras o estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo. A continuación, se añade la proteína KRAS WT humana marcada con His, y se dispensan los reactivos HTRF: el anticuerpo anti-6His marcado con criptato de europio y el reactivo GTP-Red. Los reactivos marcados con fluoróforos HTRF pueden premezclarse y añadirse en un solo paso de dispensación. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido. Interacción entre la aplicación y la proteína.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 2 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Ensayo de unión de clase objetivo
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo