Revvity, 64BDMDM2PEH, kit de unión HTRF MDM2, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
Una forma rápida y sencilla de identificar nuevos aglutinantes para la proteína MDM2.
La MDM2, también conocida como doble minuto murino 2, participa en numerosos procesos biológicos y está estrechamente relacionada con la reparación del ADN, la detención del ciclo celular, la apoptosis y la aparición de numerosas enfermedades. Es una de las ligasas E3 más populares, reclutada por quimeras bifuncionales dirigidas a la proteólisis (PROTAC) para inducir la ubiquitinación y la posterior degradación proteasómica de una proteína diana. La MDM2 interactúa con diversas proteínas para formar el complejo funcional de la ubiquitina ligasa E3, en el que actúa como receptor de sustrato del complejo y dirige diversas proteínas a la proteólisis.
Por lo tanto, la identificación de nuevos ligandos PROTAC MDM2 puede mejorar la degradación selectiva dependiente del proteasoma de proteínas de interés, implicadas en la aparición de enfermedades como cánceres, trastornos neurodegenerativos y metabólicos.
Cómo funciona
Principio del ensayo
El kit de unión HTRF MDM2 es un formato de ensayo competitivo que utiliza el ligando rojo MI-1061 como ligando MDM2, una proteína MDM2 humana marcada con GST y un anticuerpo anti-GST marcado con criptato de europio. Los compuestos de unión a MDM compiten con el ligando rojo MI-1061 de HTRF y, por lo tanto, impiden la FRET.

Protocolo de ensayo
El ensayo de unión de MDM2 puede ejecutarse en una placa blanca de bajo volumen de 96 o 384 pocillos (20 µL final). Como se describe aquí, las muestras o estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo. A continuación, se añade la proteína MDM2 marcada con GST, seguido de la dispensación de los reactivos HTRF: el anticuerpo anti-GST marcado con criptato de europio y el ligando MI-1061 marcado con un aceptor rojo HTRF. Los reactivos marcados con fluoróforos HTRF pueden premezclarse y añadirse en un solo paso de dispensación. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido. Interacción entre la aplicación y la proteína.
Compatible con automatización: Sí
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Ensayo de unión de clase objetivo
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica-Inflamación Neurociencia Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo