Revvity, 64BDVHLPEH, kit de unión de VHL humano HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
Una forma rápida y sencilla de identificar nuevos aglutinantes para la proteína VHL.
VHL, también conocido como von Hippel-Lindau, participa en muchos procesos biológicos y está estrechamente asociado con la regulación de la angiogénesis, el crecimiento celular o la supervivencia celular.
VHL es una de las ligasas E3 más populares reclutadas por quimeras bifuncionales dirigidas a la proteólisis (PROTAC) para inducir la ubiquitinación y la posterior degradación proteasomal de una proteína objetivo.
VHL interactúa con varias proteínas para formar el complejo de ubiquitinación von Hippel-Lindau funcional, en el que VHL parece actuar como una subunidad de reclutamiento objetivo en el complejo de ubiquitina ligasa E3, y dirige varias proteínas a la proteólisis, como el factor inducible por hipoxia (HIF) hidroxilado en condiciones normóxicas.
Por lo tanto, la identificación de nuevos ligandos PROTAC VHL puede mejorar la degradación selectiva dependiente del proteasoma de proteínas de interés, implicadas en la aparición de enfermedades como el cáncer.
Cómo funciona
Principio del ensayo
El kit de unión VHL humana HTRF es un formato de ensayo competitivo que utiliza un ligando VHL-Red como ligando VHL, un complejo proteico VHL humano marcado con 6His y un anticuerpo anti-6His marcado con criptato de europio. Los compuestos de unión VHL compiten con el ligando VHL-Red y, por lo tanto, impiden la FRET.

Protocolo de ensayo
El ensayo de unión de VHL puede ejecutarse en una placa blanca de bajo volumen de 96 o 384 pocillos (20 µL final). Como se describe aquí, las muestras o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo. A continuación, se añade el complejo proteico VHL marcado con 6His, seguido de la dispensación de los reactivos HTRF: el anticuerpo anti-6His marcado con criptato de europio y el ligando VHL marcado con un aceptor rojo HTRF. Los reactivos marcados con fluoróforos HTRF pueden premezclarse y añadirse en un solo paso de dispensación. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido. Interacción entre la aplicación y la proteína.
Compatible con automatización: Sí
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 5 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Ensayo de unión de clase objetivo
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica-Inflamación Neurociencia Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo