Revvity, 64BRD7TPEH, kit de detección de BRD7 total en humanos y ratones HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo celular Total BRD7 monitorea los niveles de proteína BRD7.
El bromodominio 7 (BRD7), también conocido como NAG4, BP75 o CELTIX1, pertenece a la familia IV de proteínas con bromodominio, que también incluye la proteína BRD9. BRD7 se localiza principalmente en el núcleo y regula la remodelación de la cromatina. BRD7 es un componente de un gran complejo polibromo-BAF (PBAF), que incluye ARID2, PBRM1 y BAF45d, que interactúa con reguladores transcripcionales para modular la expresión génica.
Más importante aún, estudios recientes han demostrado que la expresión de BRD7 se encuentra disminuida en ciertos tipos de cáncer, como el carcinoma epitelial de ovario, el cáncer de mama, el cáncer nasofaríngeo y el carcinoma colorrectal. A diferencia de las funciones prooncogénicas de BRD9, BRD7 podría actuar como supresor tumoral al inhibir la vía de la fosfoinosítido 3-quinasa (PI3K), implicada en diversos procesos oncogénicos desregulados, como la apoptosis, la síntesis de proteínas, la proliferación y la angiogénesis.
Dado que las proteínas BRD7 y BRD9 comparten una similitud de residuos del 72 %, es probable que los compuestos se dirijan tanto al supresor tumoral BRD7 como al prooncogén BRD9. Por lo tanto, es necesario investigar cuidadosamente la selectividad de los compuestos que se dirigen a BRD9 o BRD7. Para ello, el kit HTRF total BRD7 es un valioso ensayo complementario al kit HTRF total BRD9, lo que permite un perfilado fiable de compuestos.
Cómo funciona
Principio del ensayo Total-BRD7
El ensayo HTRF Total-BRD7 cuantifica el nivel de expresión de BRD7 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total-BRD7 utiliza dos anticuerpos marcados: uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de BRD7 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas para Total-BRD7
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Total-BRD7 HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa para Total-BRD7
La detección de Total-BRD7 con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Compatible con automatización: Sí
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 4
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo