Revvity, 64BRD9TPEH, kit de detección de BRD9 total en humanos y ratones HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
BRD9 (proteína 9 con bromodominio BRD9) pertenece a la familia IV de proteínas con bromodominio, que también incluye a BRD7. BRD9 es una subunidad SWI/SNF (GBAF o ncBAF) y se une a residuos de lisina acetilada de histonas, mediando la remodelación de la cromatina y los reguladores transcripcionales. BRD9 participa en la regulación de la pluripotencia y el desarrollo celular.
La sobreexpresión de BRD9 se ha asociado con trastornos del neurodesarrollo y cánceres como la leucemia mieloide aguda. La degradación de BRD9 mediante moléculas PROTAC se ha convertido recientemente en un enfoque terapéutico novedoso y prometedor. Sin embargo, las proteínas BRD9 y BRD7 comparten un 72 % de similitud de residuos, por lo que es probable que los compuestos se dirijan tanto al prooncogén BRD9 como al supresor tumoral BRD7. Por lo tanto, es necesario investigar cuidadosamente la selectividad de los compuestos que se dirigen a BRD9 o BRD7. Para ello, el kit HTRF total BRD7 es un valioso ensayo complementario al kit HTRF total BRD9, que permite la elaboración de perfiles de compuestos fiables.
Cómo funciona
Principio del ensayo Total-BRD9
El ensayo HTRF Total-BRD9 cuantifica el nivel de expresión de BRD9 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total-BRD4 utiliza dos anticuerpos marcados: uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de BRD9 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de Total-BRD9
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Total-BRD9 HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa para Total-BRD9
La detección de Total-BRD9 con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Compatible con automatización: Sí
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2, tampón de lisis 3, tampón de lisis 4
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo