Revvity, 64CDC6S54PEG, kit de detección de fosfo-CDC6 (Ser54) humano y murino HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
CDC6, o Ciclo de División Celular 6, pertenece a la familia de las ATPasas AAA+ y desempeña un papel crucial en la regulación de la replicación del ADN. Es un componente esencial del complejo de prerreplicación, facilitando su ensamblaje en los orígenes de replicación para garantizar que la replicación del ADN ocurra solo una vez por ciclo celular. Además de su papel en la iniciación de la replicación, CDC6 también contribuye a la activación y el mantenimiento de los puntos de control del ciclo celular, vitales para preservar la estabilidad genómica.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo de fosfo-CDC6 (Ser54)
El ensayo Fosfo-CDC6 (Ser54) mide la CDC6 fosforilada en Ser54. A diferencia del Western Blot, este ensayo se realiza completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia.
El ensayo utiliza dos anticuerpos: uno marcado con un fluoróforo donante y el otro con un fluoróforo aceptor. El primer anticuerpo se seleccionó por su unión específica al motivo fosforilado de la proteína, mientras que el segundo reconoce la proteína independientemente de su estado de fosforilación.
La fosforilación de la proteína permite la formación de un inmunocomplejo que involucra ambos anticuerpos marcados, acercando el fluoróforo donante al aceptor. Esta interacción genera una señal de FRET, cuya intensidad es directamente proporcional a la concentración de proteína fosforilada en la muestra. El ensayo proporciona un método fiable para evaluar el estado de fosforilación de la proteína sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de fosfo-CDC6 (Ser54)
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección HTRF de Fosfo-CDC6 (Ser54). Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de fosfo-CDC6 (Ser54)
La detección de CDC6 fosforilada (Ser54) con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado para HTS, permite la miniaturización manteniendo la calidad HTRF. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1
Modificación molecular-fosforilación
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Objetivo-CDC6
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Área Terapéutica-Oncología
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo