Revvity, 64CDK5TPEH, kit de detección de CDK5 total en humanos y ratones HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
La CDK5 pertenece a la familia de las quinasas dependientes de ciclina (Cdks). A pesar de presentar una alta homología de secuencia con otros miembros de la familia Cdks, la CDK5 es un miembro inusual, ya que no participa directamente en la regulación del ciclo celular y su activación no requiere el estado de fosforilación ni la unión a una ciclina.
CDK5 representa un objetivo farmacológico atractivo ya que su desregulación está implicada en diversas enfermedades neurodegenerativas como el Alzheimer, el Parkinson y varios tipos de cáncer.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo de CDK5 total
El ensayo Total CDK5 cuantifica el nivel de expresión de CDK5 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se realiza completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de CDK5 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de CDK5 total
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección HTRF Total CDK5. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa para CDK5 total
La detección de CDK5 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2, tampón de lisis 3, tampón de lisis 4
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo