Revvity, 64CK1ATPEG, kit de detección de CK1a total en humanos y ratones HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
La caseína quinasa 1 (CK1) es una serina/treonina quinasa que se expresa de forma ubicua en organismos eucariotas. Entre sus siete isoformas, la CK1 alfa participa en una amplia gama de procesos celulares, como el tráfico de membranas, la progresión del ciclo celular, la segregación cromosómica, la apoptosis, la autofagia, el metabolismo celular, la diferenciación, el ritmo circadiano, la respuesta inmunitaria, la neurodegeneración y el cáncer.
Los CELMoD (fármacos moduladores de la ligasa E3 de Cereblon), derivados de los IMID (fármacos imida inmunomoduladores), representan un enfoque terapéutico prometedor en el tratamiento del cáncer, en particular en neoplasias hematológicas, gracias a su mecanismo como adhesivos moleculares. Cabe destacar que algunos CELMoD, como la iberdomida y el CC-92480, actúan específicamente sobre la CK1A promoviendo su ubiquitinación y degradación, inhibiendo así el crecimiento y la proliferación de células cancerosas.
Cómo funciona
Principio del ensayo de CK1A total
El ensayo de CK1A total cuantifica el nivel de expresión de CK1A en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo de CK1A total utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de CK1A en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de CK1A total
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección HTRF Total CK1A. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa para CK1A total
La detección de CK1A total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Cuantificación de proteínas.
Marca-HTRF
Tampón/Tampón de lisis de disolvente 1
Modalidad de detección-HTRF
Especie huésped: ratón humano
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Objetivo-CK1a
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología de la inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo