Revvity, 64CRAFS43PEH, kit de detección de fosforilación humana HTRF (Ser43), 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
El kit de ensayo celular Phospho-c-RAF (Ser43) está diseñado para la cuantificación robusta de cRaf fosforilada en Ser-43 directamente mediante un protocolo optimizado de mezcla y lectura, sin lavado. cRaf desempeña un papel fundamental en la proliferación y diferenciación celular. Este kit puede utilizarse desde la investigación básica hasta el cribado de fármacos de alto rendimiento. Su versatilidad lo hace adecuado para diversas aplicaciones, desde la investigación básica hasta el análisis de cuestiones farmacológicas en modelos celulares, y tiene aplicaciones en la investigación oncológica y de enfermedades infecciosas.
Cómo funciona
Principio del ensayo de fosfo-c-RAF (Ser43)
El ensayo Phospho-c-RAF (Ser43) mide c-RAF cuando se fosforila en Ser43. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Phospho-c-RAF (Ser43) utiliza dos anticuerpos marcados: uno con un fluoróforo donante y el otro con un aceptor. El primer anticuerpo se seleccionó por su unión específica al motivo fosforilado de la proteína, y el segundo por su capacidad de reconocer la proteína independientemente de su estado de fosforilación. La fosforilación de la proteína permite la formación de un inmunocomplejo que involucra a ambos anticuerpos marcados y que acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de proteína fosforilada presente en la muestra y permite evaluar el estado de fosforilación de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de 2 placas de fosfo-c-RAF (Ser43)
El protocolo de 2 placas implica el cultivo celular en una placa de 96 pocillos antes de la lisis. Posteriormente, los lisados ​​se transfieren a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección HTRF Phospho-c-RAF (Ser43). Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de fosfo-c-RAF (Ser43)
La detección de c-RAF fosforilado (Ser43) con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2
Modificación molecular-fosforilación
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica: Metabolismo cardiovascular/Oncología diabética e inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo