Revvity, 64CRAFTPEG, kit de detección de c-RAF total humano HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
El kit de ensayo celular de c-Raf total o Raf-1 está diseñado para la cuantificación robusta de cRaf total mediante un protocolo optimizado de mezcla y lectura, sin lavado. cRaf desempeña un papel fundamental en la proliferación y diferenciación celular. Este kit se puede utilizar desde la investigación básica hasta el cribado de fármacos de alto rendimiento. Su versatilidad lo hace adecuado para diversas aplicaciones, desde la investigación básica hasta el análisis de cuestiones farmacológicas en modelos celulares, y tiene aplicaciones en la investigación oncológica y de enfermedades infecciosas.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo Total-cRaf
El ensayo Total cRaf cuantifica el nivel de expresión de cRaf en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total cRaf utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de eNOS en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de TotalcRaf
El protocolo de dos placas implica el cultivo celular en una placa de 96 pocillos antes de la lisis. Posteriormente, los lisados ​​se transfieren a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección HTRF Total cRaf. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de cRaf total
La detección de eNOS total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Compatible con automatización: Sí
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica: Metabolismo cardiovascular/Oncología diabética e inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo