Revvity, 64CREPET, kit de detección de fosfo-CREB (Ser133) humano y murino HTRF, 96 puntos de ensayo

Descripción general
El kit fosfo-CREB (S133) es óptimo para la detección cuantitativa de la proteína de unión al elemento sensible al AMP cíclico cuando se fosforila en S133, lo que permite verificar el estado de fosforilación de CREB con respecto a su nivel estacionario en las células. CREB funciona como un factor de transcripción, que emite señales aguas abajo de MAPK/ERK y se activa mediante diversas vías, como MAPK/ERK, PI3K/AKT y la señalización por estrés. CREB desempeña un papel crucial en la promoción de la plasticidad neuronal, las capacidades cognitivas, la proliferación celular, la supervivencia y la homeostasis de la glucosa.
Cómo funciona
Principio del ensayo de fosfo-CREB (S133)
El ensayo Phospho-CREB (S133) mide la fosforilación de CREB en S133. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Phospho-CREB (S133) utiliza dos anticuerpos marcados: uno con un fluoróforo donante y el otro con un aceptor. El primer anticuerpo se selecciona por su unión específica al motivo fosforilado de la proteína, mientras que el segundo por su capacidad de reconocer la proteína independientemente de su estado de fosforilación. La fosforilación de la proteína permite la formación de un inmunocomplejo que involucra a ambos anticuerpos marcados y que acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de proteína fosforilada presente en la muestra y permite evaluar el estado de fosforilación de las proteínas en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de 2 placas de Phospho-CREB (S133)
El protocolo de 2 placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, a continuación, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección HTRF Phospho-CREB (S133). Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de fosfo-CREB (S133)
La detección de CREB fosforilado (S133) con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 3
Modificación molecular-fosforilación
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica: Metabolismo/Diabetes, EHNA/Fibrosis, Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 96 puntos de ensayo