Revvity, 64CYCB1S1PEG, kit de detección de fosfociclina B1 humana HTRF (Ser126), 500 puntos de ensayo

Descripción general
Este ensayo basado en células HTRF proporciona una forma conveniente y precisa de detectar ciclina B1 fosforilada en Ser126.
Los miembros de la familia de la ciclina B (incluidas las ciclinas B1 y B2) son importantes reguladores de la progresión del ciclo celular. Son mediadores esenciales de la transición dependiente del factor de crecimiento de las fases G2 a la mitosis, desempeñando la función de la subunidad reguladora de CDK1.
La ciclina B1 se regula positivamente en presencia de estímulos mitogénicos extracelulares y posteriormente se regula negativamente rápidamente por la degradación proteasomal tras su fosforilación en Ser126.
La ciclina B1 suele sobreexpresarse en muchos tipos de cáncer. Esta sobreexpresión anormal de ciclina B1 provoca una actividad desregulada de CDK1 y puede conducir a la tumorigénesis.
Cómo funciona
Principio del ensayo de fosfociclina B1 (Ser126)
El ensayo de Fosfociclina B1 (Ser126) mide la ciclina B1 cuando se fosforila en Ser126. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo utiliza dos anticuerpos: uno marcado con un fluoróforo donante y el otro con un aceptor. El primer anticuerpo se seleccionó por su unión específica al motivo fosforilado de la proteína, y el segundo por su capacidad para reconocer la proteína independientemente de su estado de fosforilación. La fosforilación de la proteína permite la formación de un inmunocomplejo que involucra a ambos anticuerpos marcados. Esto acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de proteína fosforilada presente en la muestra y permite evaluar el estado de fosforilación de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de fosfociclina B1 (Ser126)
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección HTRF de Fosfociclina B1 (Ser126). Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de fosfociclina B1 (Ser126)
La detección de la ciclina B1 fosforilada (Ser126) con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Modificación molecular-fosforilación
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Tecnología-TR-FRET
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo