Revvity, 64CYCE1TPEG, kit de detección de ciclina E1 total humana HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
Las ciclinas de tipo E desempeñan un papel importante en la transición de las células quiescentes al ciclo celular. Se han descrito previamente dos ciclinas de tipo E: la ciclina E1 y la ciclina E2. Se sabe que la ciclina E1 activa la CDK2, induciendo la transición a la fase S y la síntesis de ADN asociada a la mitosis. La sobreexpresión de la ciclina E1 está directamente relacionada con muchos tipos de cáncer.
Este kit es compatible con el tampón de los kits Total & phospho-CDK2 (‰ 64CDK2TPEG y ‰ 64CDK2Y15PEG), por lo que el mismo lisado se puede utilizar para análisis del nivel de Ciclina E1 total, CDK2 total y CDK2 fosfo Tyr15.
Cómo funciona
Principio del ensayo de ciclina E1 total
El ensayo de Ciclina E1 Total cuantifica el nivel de expresión de Ciclina E1 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo de Ciclina E1 Total utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de Ciclina E1 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de ciclina E1 total
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen antes de añadir los reactivos de detección de HTRF de Ciclina E1 Total. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de ciclina E1 total
La detección de ciclina E1 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, tratamiento y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2, tampón de lisis 3, tampón de lisis 4
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo