Revvity, 64DSRNAPEG, kit de detección de ARNdc HTRF (IVT), 500 puntos de ensayo

Descripción general
La transcripción in vitro (TIV) es una técnica de biología molecular que se utiliza para sintetizar secuencias de ARN a partir de una plantilla de ADN. Durante este proceso, la plantilla de ADN se incuba con ARN polimerasa y ribonucleótidos, lo que da como resultado copias de ARN de la plantilla.
Si bien este proceso tiene como objetivo producir secuencias de ARN monocatenario (ARNmc), también es propenso a generar contaminantes de ARN bicatenario (ARNdc). Estos pueden surgir por diversas razones (pausa de la polimerasa, formación de estructura secundaria, contaminación de la plantilla, etc.) y son indeseables en el producto final.
Las aplicaciones terapéuticas finales de la IVT se relacionan principalmente con la terapia génica y el desarrollo o la producción de vacunas de ARNm. En muchos casos, estas aplicaciones forman parte de los procesos de producción de productos destinados a pacientes. Una de las principales preocupaciones al ejecutar estos procesos es el control de calidad (QA/QC), así como la seguridad del paciente con los resultados finales. Por ello, el ARNdc es un contaminante que debe monitorizarse con gran atención y herramientas robustas, ya que suele ser una molécula altamente inmunogénica que puede ser captada por múltiples receptores de ácidos nucleicos de nuestra inmunidad innata y desencadenar respuestas inmunitarias e inflamatorias intensas en los pacientes. Por lo tanto, se requiere una cuantificación rápida, práctica y robusta del ARNdc en múltiples etapas de purificación del proceso de IVT para garantizar la máxima eliminación de dicho contaminante.
Este kit HTRF dsRNA (IVT) está diseñado para la detección robusta de dsRNA en muestras de IVT. Desarrollado específicamente para aplicaciones de IVT, ofrece una alternativa homogénea y lista para usar a los métodos tradicionales de ELISA y Dot-blot.
Cómo funciona
Principio del ensayo HTRF dsRNA (IVT)
El ensayo de ARN bicatenario (IVT) mide el ARN bicatenario en muestras. Este ensayo utiliza dos anticuerpos marcados: uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. En presencia de ARN bicatenario en una muestra, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de ARN bicatenario presente en la muestra en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo del ensayo de ARNdc HTRF (IVT)
El protocolo del ensayo de ARNdc (IVT), que utiliza una placa blanca de pequeño volumen de 384 pocillos, se describe a la derecha. Se dispensan 10 µL de muestra o estándar directamente en la placa de detección para su detección con reactivos HTRF™. Los anticuerpos marcados con fluoróforos HTRF se añadieron antes de una incubación nocturna. El ensayo puede ejecutarse en un formato de hasta 1536 pocillos simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido. Aplicación: Cuantificación de Proteínas.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 10 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
ARNdc objetivo
Clase objetivo: ácido nucleico
Tecnología-TR-FRET
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo