Revvity, 64EGFRD19PEH, kit de detección de EGFR DEL19 total humano HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
La farmacorresistencia en pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas con mutación del EGFR tratados con inhibidores de la tirosina quinasa (ITK) es uno de los principales desafíos de la terapia dirigida contra el cáncer. Se espera que el diseño de compuestos PROTAC específicos para degradar las proteínas con mutación del EGFR ofrezca un enfoque prometedor para tratar a estos pacientes y superar la farmacorresistencia.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo Total-EGFR EX19DEL
El ensayo HTRF Total-EGFR EX19DEL cuantifica el nivel de expresión de EGFR cuando se elimina el exón 19 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, el ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total-EGFR EX19DEL utiliza dos anticuerpos marcados: uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de EGFR EX19DEL en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas Total-EGFR EX19DEL
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Total-EGFR EX19DEL HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa Total-EGFR EX19DEL
La detección de Total-EGFR EX19DEL con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2, tampón de lisis 3, tampón de lisis 4
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo