Revvity, 64ERAPEH, kit de detección del receptor de estrógeno total α humano HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo de detección del receptor de estrógeno humano alfa HTRF monitorea la expresión del receptor de estrógeno alfa endógeno o sobreexpresado en varias células.
El receptor de estrógeno alfa es un tipo de receptor nuclear que se activa por hormonas de estrógeno, como el estradiol (E2).
Los estrógenos se unen al dominio de unión al ligando del receptor de estrógeno alfa, lo que resulta en la homodimerización del receptor y la translocación al núcleo. Esto activa la expresión génica descendente y la activación de vías de señalización, como la vía PI3K/AKT. La expresión génica inducida por el receptor de estrógeno alfa resulta en la división y proliferación celular. Una desregulación de la vía del receptor de estrógeno alfa podría conducir a fenotipos oncogénicos, y la activación o sobreexpresión del receptor de estrógeno alfa se ha relacionado ampliamente con el cáncer de mama (en más del 70% de los casos). Por lo tanto, el receptor de estrógeno alfa se ha convertido en un importante objetivo farmacológico para la industria farmacéutica. El desarrollo de compuestos PROTAC para dirigir la degradación del receptor de estrógeno alfa es parte de la estrategia terapéutica para dirigirse a los cánceres positivos para el receptor de estrógeno alfa. Alternativamente, se puede detectar el degradador selectivo del receptor de estrógeno (SERD) con este kit, pero no el modulador selectivo del receptor de estrógeno (SERM), ya que solo afectan la señalización descendente y no el nivel de expresión de la proteína.
Cómo funciona
Principio del ensayo del kit de detección del receptor de estrógeno total alfa humano
El ensayo HTRF del Receptor de Estrógeno Humano alfa cuantifica el nivel de expresión del Receptor de Estrógeno alfa en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, el ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo del Receptor de Estrógeno Humano alfa utiliza dos anticuerpos marcados: uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia del Receptor de Estrógeno alfa en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas del kit de detección del receptor de estrógeno total humano alfa
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección del receptor de estrógeno humano alfa HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa para el kit de detección del receptor alfa de estrógeno total humano
La detección del receptor de estrógeno humano alfa con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Cuantificación de proteínas.
Compatible con automatización: Sí
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2, tampón de lisis 3, tampón de lisis 4
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Biomarcadores de clase objetivo
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo