Revvity, 64FLAGBPEG, kit de detección de banderas HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
El kit permite la detección rápida de proteínas de fusión marcadas con Flag en cada etapa de la producción y purificación de proteínas. Puede utilizarse para verificar que el motivo Flag de una proteína de fusión sea accesible al anticuerpo anti-FLAG o para estimar la concentración de una proteína marcada con Flag. Al calibrarse con la proteína adecuada, el ensayo es excepcionalmente preciso y compatible con los procedimientos normalizados de trabajo (POE). También puede utilizarse para eliminar falsos positivos.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo
Como se muestra en el gráfico, el péptido Flag marcado con d2 es detectado por el conjugado anti-Flag-Criptato de Eu. La proteína de fusión marcada con Flag que se desea determinar compite con el conjugado Flag-péptido-d2 por la unión al conjugado anti-Flag-Criptato de Eu. La señal específica es inversamente proporcional a la concentración de la proteína de fusión marcada con Flag.

Protocolo de ensayo
El ejemplo de la derecha describe el protocolo con un volumen final de ensayo de 20 µL. Dispensar 10 µL de la proteína estándar o de interés marcada con Flag en un pocillo, con 5 µL de conjugado anti-Flag-Criptato de Eu y 5 µL de conjugado de péptido Flag-d2. Incubar durante 1 hora a temperatura ambiente y luego leer. Marca: HTRF.
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 10 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Tecnología-TR-FRET
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo