Product Description
Descripción general
p21, también conocido como inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina 1 o proteína 1 que interactúa con CDK, es un inhibidor clave del complejo ciclina-CDK que se une a la ciclina-CK2, ciclina-CDK1 y ciclina-CDK4/6, y regula su actividad. p21 trabaja en conjunto con p53 para lograr el arresto del ciclo celular posterior al daño del ADN, y está regulado negativamente por la degradación de proteínas impulsada por la ubiquitina ligasa.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:
Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo HTRF Human p21
El ensayo HTRF Human p21 cuantifica el nivel de expresión de p21 humano en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo utiliza dos anticuerpos marcados: uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. En presencia de p21 en un lisado celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.
Protocolo de ensayo de dos placas de p21 humano HTRF
El protocolo de dos placas implica el cultivo celular en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y la posterior transferencia de los lisados a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección de p21 HTRF humana. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células. Aplicación: Señalización celular.
Compatible con automatización: Sí
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo
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Collaboration
Tony Tang
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