Revvity, 64HPK1TPEG, kit de detección de HPK1 total humana HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
La quinasa progenitora hematopoyética 1 (HPK1) es una serina/treonina quinasa que participa principalmente en la regulación de la señalización celular inmunitaria. Desempeña un papel crucial en la señalización del receptor de linfocitos T (TCR) al modular las vías descendentes que influyen en la activación, proliferación y diferenciación de los linfocitos T. La HPK1 regula negativamente la señalización del TCR al fosforilar proteínas adaptadoras como SLP-76, lo que inhibe las respuestas de los linfocitos T. Además, la HPK1 participa en la señalización del receptor de linfocitos B (BCR), lo que afecta a la activación y función de estos linfocitos. También contribuye a la respuesta inmunitaria innata al modular las vías en las células mieloides, como las células dendríticas y los macrófagos, lo que afecta a la producción de citocinas y la migración celular. Más allá de las células inmunitarias, la HPK1 se ha implicado en la regulación de la apoptosis y la progresión del ciclo celular, influyendo en la homeostasis de las células hematopoyéticas. Debido a sus funciones reguladoras, HPK1 es un objetivo terapéutico potencial para trastornos y cánceres relacionados con el sistema inmunitario.
Cómo funciona
Principio del ensayo de HPK1 total
El ensayo Total HPK1 cuantifica el nivel de expresión de HPK1 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total HPK1 utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de HPK1 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas para HPK1 total
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección HTRF Total HPK1. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa para HPK1 total
La detección de HPK1 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, facilita la miniaturización, manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Tampón/Tampón de lisis de disolvente 4
Modalidad de detección-HTRF
Especie huésped: humana
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Objetivo-HPK1
Clase objetivo: fosfoproteínas
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología de la inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo