Revvity, 64HPRTPEG, kit de detección de progesterona total humana HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo de detección del receptor de progesterona humano HTRF monitoriza la expresión del receptor de progesterona endógeno o sobreexpresado en diversas células. El kit reconoce las isoformas PRA y PRB.
El receptor de progesterona (PR) es un receptor nuclear activado por la progesterona. Esta hormona atraviesa la membrana celular y se une al receptor. Tras la unión, el PR se homodimeriza, lo que permite su translocación al núcleo. En combinación con un coactivador, el dímero del receptor se reclutará al elemento de respuesta a la progesterona (PRE) e inducirá la expresión génica, lo que conduce al equilibrio entre la proliferación y la apoptosis. La expresión del PR está modulada por el receptor de estrógeno. Por lo tanto, el PR es un biomarcador comúnmente utilizado como indicador de la función del receptor de estrógeno-α. También se ha descrito que la vía de la quinasa MAPK influye en la actividad del PR a través de la fosforilación.
Cómo funciona
Principio del ensayo del kit de detección del receptor total de progesterona humana
El ensayo HTRF del receptor de progesterona humana cuantifica el nivel de expresión del receptor de progesterona en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, el ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo del receptor de progesterona humana utiliza dos anticuerpos marcados: uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia del receptor de progesterona en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas del kit de detección del receptor de progesterona total humano
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección del receptor de progesterona humana HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa para el kit de detección del receptor de progesterona total humano
La detección del receptor de progesterona humana con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2, tampón de lisis 3, tampón de lisis 4
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo