Revvity, 64HTTMPEG, kit de detección de HTT mutante humano y murino HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
La huntingtina (HTT) es una proteína citoplasmática altamente expresada en el cerebro y cuyo papel antiapoptótico es fundamental para la supervivencia neuronal.
La proteína de tipo silvestre (WT) presenta una estructura funcional, con un dominio de poliglutamina (poliQ) "normal" que contiene menos de 36Q. La proteína HTT mutante alberga un tracto poliQ anormalmente largo (>36Q), lo que provoca la agregación de la proteína inoperante. La agregación de HTT provoca la muerte neuronal selectiva, responsable de la enfermedad de Huntington.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo de HTT mutante
El ensayo Mutant HTT se basa en un inmunoensayo sándwich TR-FRET que utiliza dos anticuerpos específicos: uno marcado con criptato Tb3+ (donador) y el otro con d2 (aceptor). Un anticuerpo se dirige contra la porción N-terminal de la proteína, mientras que el segundo reconoce específicamente el dominio poliQ mutante. Ambos anticuerpos se unen a la Mutant HTT soluble, y la proximidad entre el donador y el aceptor permite una señal fluorescente TR-FRET. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de Mutant HTT soluble presente en la muestra (lisado celular o tisular).

Protocolo de ensayo de HTT mutante
El ensayo de HTT mutante puede ejecutarse en una placa de detección blanca de bajo volumen de 96 o 384 pocillos (20 µL final). Como se describe aquí, las muestras (lisados ​​celulares/tiroideos) o los estándares se dispensan directamente en la placa de ensayo para la detección de HTT mutante mediante reactivos HTRF®. Los anticuerpos marcados con fluoróforos HTRF pueden premezclarse y añadirse en un solo paso de dispensación. No se requieren lavados. El protocolo puede miniaturizarse o ampliarse aún más simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido. Aplicación: Cuantificación de proteínas.
Compatible con automatización: Sí
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 2, tampón de lisis 3
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 10 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Biomarcadores de clase objetivo
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica-Neurociencia
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo