Revvity, 64IDO1TPEG, kit de detección de IDO1 total humano HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo basado en células Total IDO1 proporciona una forma conveniente y precisa de detectar los niveles totales de IDO1 dentro de las células.
La IDO1 (indolamina 2,3 dioxigenasa 1) es la enzima limitante más importante de la vía de la quinurenina debido a su capacidad para catalizar la degradación del L-triptófano (Trp) a metabolitos de quinurenina (Kyn). La depleción de Trp y la producción de Kyn promueven la inmunosupresión al inhibir las células T efectoras CD8+ y las células NK. También aumenta la actividad de las células Treg CD4+ y las MDSC (células supresoras de origen mieloide). La IDO1 también desempeña un papel clave en la promoción del desarrollo de nuevos vasos sanguíneos (angiogénesis).
IDO1 se sobreexpresa en diferentes células tumorales y se infiltra en las células inmunes, lo que conduce al escape inmunológico del tumor y a la neovascularización.
Aunque se han desarrollado inhibidores de IDO1 para inhibir el metabolismo del triptófano, estas terapias han tenido un éxito limitado en la prolongación de la supervivencia de los pacientes. Estudios recientes se han centrado en la degradación proteica dirigida (TPD) de IDO1 como una estrategia terapéutica potencialmente más eficaz.
Cómo funciona
Principio del ensayo IDO1 total

El ensayo Total IDO1 cuantifica el nivel de expresión de IDO1 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total IDO1 utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de IDO1 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de IDO1 total
El protocolo de 2 placas implica el cultivo celular en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y la posterior transferencia de los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección HTRF Total IDO1. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa para IDO1 total
La detección de IDO1 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Tecnología-TR-FRET
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo