Revvity, 64IKZF1TPEG, kit de detección de IKZF1 total en humanos y ratones HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
La familia de factores de transcripción de dedo de zinc Ikaros (IKZF) es un regulador esencial de la linfopoyesis. IKZF1 (Ikaros) e IKZF3 (Aiolos) funcionan como represores y activadores transcripcionales durante la diferenciación de linfocitos T y B, así como en la función de las células maduras. Las proteínas de la familia Ikaros se asocian con múltiples complejos, como NuRD, PRC2 y factores de elongación de la transcripción. Mediante estas asociaciones, pueden modular los perfiles de expresión génica y el estado de la cromatina. La sobreexpresión de estas proteínas se ha relacionado con el mantenimiento de la proliferación y supervivencia de células cancerosas, como las células plasmáticas malignas y el mieloma múltiple.
Entre las estrategias terapéuticas investigadas para combatir el cáncer, el uso de IMID (fármacos imida inmunomoduladores) y sus derivados, denominados CELMoD (fármacos moduladores de la ligasa E3 de Cereblon), se ha popularizado. Al unirse a CRBN, estos compuestos inducen la ubiquitinación de proteínas diana y promueven su posterior degradación. Los CELMoD dirigidos a IKZF1 e IKZF3 han mostrado una prometedora actividad antitumoral en modelos celulares de mieloma múltiple.
Cómo funciona
Principio del ensayo IKZF1 total

El ensayo HTRF Total IKZF1 cuantifica el nivel de expresión de IKZF1 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total IKZF1 utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de IKZF1 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de IKZF1 total
El protocolo de 2 placas implica el cultivo celular en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y la posterior transferencia de los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Total IKZF1 HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de IKZF1 total
La detección de IKZF1 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Tecnología-TR-FRET
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo