Revvity, 64IRTPEH, kit de detección de IRS2 total en humanos y ratones HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
Los sustratos del receptor de insulina (IRS) 1 y 2 son los sustratos principales de los receptores de insulina/IGF1 y median el crecimiento/supervivencia celular y la homeostasis metabólica. Mientras que el IRS1 se encuentra principalmente en el tejido adiposo, el IRS2 es la forma predominante en las células beta pancreáticas y el sistema nervioso central (SNC). La disminución de los niveles de IRS2 se asocia con diabetes y neurodegeneración, mientras que una sobreexpresión elevada de IRS2 impulsa la motilidad y la invasión tumoral. Este ensayo celular mide la modulación de los niveles de la proteína IRS2.
Cómo funciona
Principio del ensayo IRS2 total
El ensayo IRS2 total cuantifica el nivel de expresión de IRS2 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo IRS2 total utiliza dos anticuerpos marcados: uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de IRS2 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de 2 placas de IRS2 total
El protocolo de 2 placas implica el cultivo celular en una placa de 96 pocillos antes de la lisis. Posteriormente, se transfieren los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección de IRS2 HTRF total. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de IRS2 total
La detección de IRS2 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 4, tampón de lisis 5
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica: Metabolismo/Diabetes, Neurociencia, Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo