Revvity, 64JAK1TPEH, kit de detección de JAK1 total humana HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
JAK1 (Janus quinasa 1) pertenece a la familia de tirosina quinasas Janus no receptoras, junto con JAK2, JAK3 y TYK2. Una amplia gama de citocinas y factores de crecimiento (IL6, IL4, IFNalfa, GM-CSF) unidos a sus receptores inducen la fosforilación de las JAK. Las JAK activadas posteriormente fosforilan dianas adicionales, incluyendo tanto los receptores de citocinas como los sustratos principales: las STAT. La señalización JAK/STAT estimula la proliferación, diferenciación, migración y apoptosis celular. La alteración de la señalización JAK/Stat para reducir las respuestas proinflamatorias inducidas por citocinas representa una diana atractiva para las terapias antiinflamatorias.
Cómo funciona
Principio del ensayo de JAK1 total
El ensayo Total-JAK1 cuantifica el nivel de expresión de JAK1 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total-JAK1 utiliza dos anticuerpos marcados: uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de JAK1 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de 2 placas de Total-JAK1
El protocolo de 2 placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección de JAK1 HTRF total. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de JAK1 total
La detección de JAK1 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Compatible con automatización: Sí
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 2, tampón de lisis 4
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica-Inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo