Revvity, 64JAK3TPEH, kit de detección de JAK3 total humana HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo de detección de JAK3 total humano monitorea los niveles de proteína JAK3 celular.
Las quinasas de la familia Janus, JAK1, JAK2, JAK3 y TYK2, son proteínas tirosina quinasas no receptoras que señalizan receptores de citocinas (principalmente IL-R e IFN-R) y activan los factores de transcripción STAT. Una combinación específica de JAK/JAK se asocia con un receptor específico y confiere especificidad a la vía de señalización JAK/STAT. JAK3, en combinación con JAK1, se asocia exclusivamente con los receptores de la familia IL-2Rγ y desencadena la activación de los factores de transcripción STAT1, STAT3, STAT5 y STAT6 para regular la maduración, supervivencia, activación y diferenciación de los linfocitos.
Se ha descrito la desregulación de JAK3 en cáncer y trastornos inmunitarios. Las principales estrategias terapéuticas consisten en desarrollar inhibidores/degradadores potentes y selectivos de JAK3.
Cómo funciona
Principio del ensayo de JAK3 total
El ensayo Total JAK3 cuantifica el nivel de expresión de JAK3 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total JAK3 utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de JAK3 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas para JAK3 total
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección de JAK3 HTRF total. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa para JAK3 total
La detección de JAK3 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Compatible con automatización: Sí
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 3, tampón de lisis 4
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica-Inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo