Revvity, 64KI67PEG, kit de detección de Ki-67 humano HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
La expresión del antígeno nuclear relacionado con la proliferación Ki-67, también conocido como Ki67 o MKI67, es un marcador celular de proliferación que solo se detecta en células en división. Ki-67 es una proteína no histona que se caracteriza por ser un antígeno relacionado con la proliferación asociado a la matriz nuclear, presente durante todo el ciclo celular, pero no en células en reposo (fase G0). Ki-67 se utiliza ampliamente en patología rutinaria como marcador de proliferación para medir la fracción de crecimiento celular en tumores humanos. La proteína Ki-67 presente en el núcleo de las células en proliferación se libera tras la lisis celular, y la proteína Ki-67 extraída del lisado se cuantifica mediante nuestro ensayo Ki-67 HTRF. El ensayo de cuantificación de Ki-67 es una alternativa a los ensayos de incorporación de BrdU o EdU, que son marcadores de proliferación exógenos que se incorporan al ADN recién sintetizado de las células en división. El alcance de Ki-67 es similar al del antígeno nuclear de células en proliferación (PCNA).
Cómo funciona
Principio del ensayo
El kit de cuantificación de Ki-67 se basa en un formato sándwich que incluye dos anticuerpos específicos, marcados respectivamente con Criptato (donante) y d2 (aceptor). La proteína Ki-67, presente en el núcleo celular en proliferación y extraída en lisados ​​celulares, se une a los conjugados monoclonales anti-Ki67 Eu Criptato y anti-Ki67 d2. Cuando los colorantes se encuentran muy próximos, la excitación del donante con una fuente de luz (láser o lámpara de flash) desencadena una Transferencia de Energía por Resonancia de Fluorescencia (FRET) hacia el aceptor, que a su vez fluoresce a una longitud de onda específica (665 nm). La señal específica se modula positivamente en proporción a la concentración de Ki-67.

Protocolo de ensayo
El protocolo del ensayo, que utiliza una placa blanca de pequeño volumen de 384 pocillos o una placa Cisbio de bajo volumen de 96 pocillos (20 µL final), se describe a la derecha. Se dispensan 4 µL de muestra (lisado) + 12 µL de tampón de lisis, o 16 µL de estándar, directamente en la placa para su detección con reactivos HTRF. Los anticuerpos marcados con donador y aceptor HTRF se pueden premezclar y añadir en un solo paso de dispensación para agilizar aún más el procedimiento. El ensayo se puede ejecutar en placas de 96 a 384 pocillos simplemente ajustando proporcionalmente el tamaño de cada volumen añadido. Aplicación: Cuantificación de Proteínas
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 4 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Biomarcadores de clase objetivo
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo