Revvity, 64KRASTPEH, kit de detección de KRAS total humano HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
KRAS es una GTPasa monomérica que transmite señales de las tirosina quinasas receptoras, promoviendo la proliferación, diferenciación y supervivencia celular. KRAS es uno de los oncogenes con mayor frecuencia de mutación en el cáncer. Esta mutación se asocia comúnmente con mal pronóstico y resistencia al tratamiento. La mutación KRAS G12C es una de las mutaciones más comunes de KRAS. KRAS G12C es constitutivamente activa, en un estado persistentemente unido a GTP, lo que provoca una sobreestimulación de las vías de señalización MAPK, que impulsan el crecimiento tumoral.
Cómo funciona
Principio del ensayo de KRAS total
El ensayo Total KRAS cuantifica el nivel de expresión de KRAS en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total KRAS utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de KRAS en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de KRAS total
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección de KRAS total HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa para KRAS total
La detección de KRAS total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, facilita la miniaturización, manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Tampón/Tampón de lisis de disolvente 6
Modalidad de detección-HTRF
Especie huésped: humana
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 4
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Objetivo-KRAS
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología de la inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo