Revvity, 64MERTK49PEG, kit de detección de fosforilación humana HTRF (Tyr749), 500 puntos de ensayo

Descripción general
MerTK (Tirosina Quinasa Mieloide-Epitelial-Reproductiva) es un receptor transmembrana de tirosina quinasa que se expresa predominantemente en células dendríticas, macrófagos, células epiteliales y células del tracto reproductivo. Al ser estimulada por ligandos como la Proteína S o Gas6, la MerTK activada confiere una ventaja de supervivencia a las células cancerosas al promover su supervivencia, mejorar la migración e inhibir la apoptosis. La sobreexpresión de MerTK está implicada en una amplia gama de cánceres, lo que la convierte en una diana interesante para las terapias contra el cáncer.
Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:

Formato homogéneo de adición y lectura
Sin pasos de lavado
Fondo bajo
Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.
Señal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.
Cómo funciona
Principio del ensayo de fosfo-MerTK (Tyr749)
El ensayo Phospho-MerTK (Tyr749) mide la MerTK fosforilada en Tyr749. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. Utiliza dos anticuerpos: uno marcado con un fluoróforo donante y el otro con un aceptor. El primer anticuerpo se seleccionó por su unión específica al motivo fosforilado de la proteína, y el segundo por su capacidad de reconocer la proteína independientemente de su estado de fosforilación. La fosforilación de la proteína permite la formación de un inmunocomplejo que involucra a ambos anticuerpos marcados, lo que acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de proteína fosforilada presente en la muestra y permite evaluar el estado de fosforilación de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de Phospho-MerTK (Tyr749)
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección HTRF Phospho-MerTK (Tyr749). Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de Phospho-MerTK (Tyr749)
La detección de MerTK fosforilada (Tyr749) con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado para HTS, facilita la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Tampón/Tampón de lisis de disolvente 4
Modalidad de detección-HTRF
Especie huésped: humana
Modificación molecular-fosforilación
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Objetivo-MerTK
Clase objetivo: fosfoproteínas
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología de la inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo