Revvity, 64METTPEG, kit de detección de MET total humano HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
c-MET, también llamada tirosina-proteína quinasa (MET) o receptor del factor de crecimiento hepatocitario (HGFR), es una proteína humana codificada por el gen MET con actividad tirosina quinasa. Actúa como receptor de tirosina quinasa, con funciones relacionadas con la cicatrización de heridas, la organogénesis y el desarrollo embrionario.
MET se expresa en las células epiteliales y se activa por los factores de los hepatocitos HGF y HSF, con ramificaciones en varias vías como la señalización RAS-MAPK, AKT y STAT3.
La activación anormal de MET se relaciona con la progresión del cáncer, con efectos sobre el crecimiento tumoral, la angiogénesis y la migración e invasión de células tumorales. Estas relaciones entre MET y células tumorales se observan en múltiples tipos de cáncer (hígado, cerebro, mama, riñón, etc.) y se sospecha que se originan por un secuestro de MET y la regulación de la expresión de su ligando, lo que conduce a su sobreexpresión y a su activación autocrina.
Cómo funciona
Principio del ensayo de MET total
El ensayo HTRF Total MET cuantifica el nivel de expresión de MET en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total MET utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de MET en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de MET total
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen (HTRF 384-lv o 96-lv) antes de añadir los reactivos de detección HTRF Total MET. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de MET total
La detección de MET total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo