Revvity, 64NAKPEG, kit de detección de FAK total HTRF en humanos y ratones, 500 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo celular de FAK total monitoriza la FAK total y se utiliza como ensayo de normalización con el kit de fosfo-FAK. Este kit es compatible con los tampones del kit de fosfo-FAK, por lo que el mismo lisado puede utilizarse para analizar tanto las poblaciones de proteínas fosforiladas como las totales.
La FAK (quinasa de adhesión focal) es una tirosina quinasa citoplasmática que controla la adhesión, migración, proliferación y supervivencia celular. Es un regulador central de la señalización de la matriz extracelular (ECM)/integrina y cadherina, y desempeña un papel en la adhesión celular, la unión celular, la migración, la supervivencia y la mecanodetección. La FAK puede ser activada por receptores de factores de crecimiento, receptores de citocinas y GPCR. El aumento de la expresión y la fosforilación de la FAK se asocia con un aumento de la adhesión, migración e invasión de células tumorales en varios tipos de cáncer, y con la migración de fibroblastos sobre fibronectina en la fibrosis tisular.
Cómo funciona
Principio del ensayo Total-FAK
El ensayo Total FAK cuantifica el nivel de expresión de FAK en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total-FAK utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de FAK en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de FAK total
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Total-FAK HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de FAK total
La detección de FAK total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2, tampón de lisis 3, tampón de lisis 4, tampón de lisis 5
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología cardiovascular, esteatohepatitis no alcohólica (NASH)/fibrosis e inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo