Revvity, 64NCLTPEG, kit de detección de nucleolina total humana HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
La nucleolina es una proteína que se localiza principalmente en el núcleo, donde participa en la biogénesis de los ribosomas al unirse al pre-ARN y estabilizarlo. También desempeña otras funciones en conjunto con los ribosomas, como la regulación de la transcripción del ARN mediante la unión a factores de transcripción y el tráfico de ARNm núcleo-citosol. El estado de fosforilación de la nucleolina regula su actividad al aumentar su afinidad de unión al ARN, y se potencia especialmente en respuesta al estrés celular y al daño del ADN. La fosforilación anormal de la nucleolina se reconoce como una posible causa de la desregulación de la transcripción del ARNm, lo que puede alterar la expresión de genes pro- y antioncogénicos y contribuir al desarrollo o la progresión del cáncer.
Cómo funciona
Principio del ensayo de nucleolina total

El ensayo de Nucleolina Total mide los niveles de nucleolina en las células. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo utiliza dos anticuerpos: uno marcado con un fluoróforo donante y el otro con un aceptor. En presencia de nucleolina, los anticuerpos marcados forman un inmunocomplejo, acercando el fluoróforo donante al aceptor y generando una señal de FRET. La intensidad de la señal es directamente proporcional a la concentración de proteína total presente en la muestra.

Protocolo de ensayo de dos placas de nucleolina total

El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección de Nucleolina Total HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de nucleolina total

La detección de nucleolina total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Compatible con automatización: Sí
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 2
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Nucleolina diana
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Oncología de la inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo