Product Description
Descripción general
El ensayo celular Total FoxO1 monitoriza el FoxO1 total y se utiliza como ensayo de normalización con el kit fosfo-FoxO1. FoxO1 pertenece a la subfamilia FOXO del factor de transcripción Forkhead, con una alta expresión en tejidos sensibles a la insulina, donde regula el metabolismo de la glucosa y los lípidos, así como la resistencia al estrés. También actúa como supresor tumoral al inhibir la proliferación celular. La desregulación de FoxO1 desempeña un papel crucial en el desarrollo de trastornos metabólicos como la diabetes y la enfermedad del hígado graso no alcohólico (EHGNA). Su disfunción también se relaciona con diversos tipos de cáncer.
Cómo funciona
Principio del ensayo Total-FoxO1
El ensayo Total-FoxO1 cuantifica el nivel de expresión de FoxO1 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total-FoxO1 utiliza dos anticuerpos marcados: uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de FoxO1 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.
Protocolo de ensayo de dos placas de Total-FoxO1
El protocolo de 2 placas implica el cultivo celular en una placa de 96 pocillos antes de la lisis. Posteriormente, se transfieren los lisados a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección de FGFR2 HTRF total. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.
Protocolo de ensayo de una placa de Total-FoxO1
La detección de FGFR2 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 4, tampón de lisis 5
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica: Metabolismo/Diabetes, EHNA/Fibrosis, Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo
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Collaboration
Tony Tang
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