Revvity, 64NK4PEH, kit de detección de MKK4 total humano HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo celular HTRF Total MKK4 monitoriza la MKK4 total y puede utilizarse como ensayo de normalización con nuestro kit de fosfo-MKK4. Este kit es compatible con los tampones del kit de fosfo-MKK4, por lo que el mismo lisado puede utilizarse para analizar poblaciones de proteínas fosforiladas y totales.
La fosforilación de MKK4 en la serina 257 es inducida por diversas MKKKinasas, como TAK1, Tpl2 o ASK1, en respuesta al estrés celular y a las citocinas proinflamatorias. Una vez fosforilada, MKK4 desencadena preferentemente la activación de JNK, que regula diversos procesos biológicos implicados en la tumorigénesis, los trastornos neurodegenerativos y la fibrosis.
Cómo funciona
Principio del ensayo Total-MKK4
El ensayo Total MKK4 cuantifica el nivel de expresión de MKK4 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total-MKK4 utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de MKK4 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de Total-MKK4
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Total-STING HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de Total-MKK4
La detección de MKK4 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2, tampón de lisis 3, tampón de lisis 4, tampón de lisis 5
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica: NASH/Fibrosis, neurociencia, oncología e inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo