Revvity, 64NTAUPEH, kit de detección de tau total humana HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo de Tau Total basado en células está diseñado para monitorizar el nivel de expresión de las proteínas Tau, tanto fosforiladas como no fosforiladas. Utiliza los mismos tampones que nuestros kits Phospho-Tau y permite el análisis de proteínas fosforiladas y totales a partir de una sola muestra.
TAU (Unidades Asociadas a Tubulina), también llamada MAPT (Proteína Tau Asociada a Microtúbulos), es una fosfoproteína expresada en gran medida en las neuronas del Sistema Nervioso Central e involucrada en el ensamblaje y estabilidad de los microtúbulos.
Tau contiene alrededor de 85 fosfositios potenciales que pueden ser fosforilados en gran medida por diversas quinasas, como CDK5, MAP quinasa o GSK3β, la quinasa principal de Tau. La hiperfosforilación de Tau induce la disrupción de los microtúbulos, su agregación en filamentos helicoidales pareados o ovillos neurofibrilares, y la muerte celular.
La hiperfosforilación y agregación de tau intervienen en numerosas enfermedades neurodegenerativas, como la tauopatía y las enfermedades de Parkinson y Alzheimer. Estos dos fenómenos, asociados con la agregación de β-amiloide, son características principales de la enfermedad de Alzheimer.
Cómo funciona
Principio del ensayo de Tau total
El ensayo de Tau Total cuantifica el nivel de expresión de Tau en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se realiza completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia.
El ensayo de Tau Total utiliza dos anticuerpos marcados: uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de Tau en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de tau total en dos placas
El protocolo de 2 placas implica cultivar células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y luego transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de agregar los reactivos de detección de Tau HTRF total.
Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de Tau total
La detección de Tau total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado.
Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2, tampón de lisis 3, tampón de lisis 4, tampón de lisis 5
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica-Neurociencia
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo