Revvity, 64NTGPEH, kit de detección de STING total humano HTRF, 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo celular Total STING monitoriza el STING total y puede utilizarse como ensayo de normalización con nuestro kit fosfo-STING. Este kit es compatible con los tampones del kit fosfo-STING, por lo que el mismo lisado puede utilizarse para analizar tanto las poblaciones de proteínas fosforiladas como las totales.
Tras la infección por patógenos y la unión del dsADN al sensor citoplasmático cGAS, la proteína STING es fosforilada por TBK1, lo que permite su unión a IRF3 que induce la producción de IFN tipo 1. La vía STING luego se desactiva mediante la degradación de STING que implica autofagia.
En inmunooncología, la activación de la vía STING ha mostrado efectos antitumorales prometedores en modelos preclínicos y, por lo tanto, representa una estrategia terapéutica para tratar el cáncer humano.
Cómo funciona
Principio del ensayo Total-STING
El ensayo Total STING cuantifica el nivel de expresión de STING en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total-STING utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de STING en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de Total-STING
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Total-STING HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa Total-STING
La detección de STING total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2, tampón de lisis 3, tampón de lisis 4, tampón de lisis 5
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Enfermedades infecciosas, oncología e inflamación
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo