Product Description
Descripción general
El kit de PARP escindido (Asp214) permite la detección específica y cuantitativa de los niveles endógenos del fragmento grande (89 kDa) de PARP-1 en humanos, ratones y monos. Con su posición central aguas abajo de las caspasas 3 y 7, ambas activadas por vías de apoptosis extrínsecas e intrínsecas, la PARP-1 escindido representa un marcador relevante de células en apoptosis. La apoptosis desregulada influye en diversas enfermedades con muerte celular insuficiente, como el cáncer, la autoinmunidad y las infecciones persistentes, mientras que la apoptosis excesiva puede contribuir a la neurodegeneración y la isquemia.
Cómo funciona
Principio del ensayo
El ensayo de PARP escindido es un inmunoensayo tipo sándwich que utiliza dos anticuerpos monoclonales específicos anti-fragmento p85 de PARP-1, uno marcado con Eu3+ Criptato (donante) y el otro con d2 (aceptor). La proximidad donante-aceptor produce una señal fluorescente TR-FRET proporcional al número de células en apoptosis. El protocolo está optimizado para un formato de placa de 384 pocillos, pero puede miniaturizarse o ampliarse fácilmente. Tras la lisis celular, el fragmento p85 de PARP-1 escindido puede detectarse semicuantitativamente utilizando los reactivos del kit de ensayo HTRF cleaved-PARP-Asp214.
Protocolo de ensayo
Protocolo de ensayo de dos placas. Para mayor flexibilidad, el ensayo puede ejecutarse con un protocolo de dos placas, donde las células se siembran y se tratan en una placa de cultivo de 96 pocillos. Para la detección, los lisados se transfieren posteriormente a una placa de ensayo sv de 384 pocillos, donde se añaden los reactivos de detección. Estos reactivos pueden premezclarse y añadirse en un solo paso de dispensación para una detección directa. No se requiere lavado en ningún paso. Esto también permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células en una placa de cultivo celular adecuada. Aplicación: Cuantificación de Proteínas.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Biomarcadores de clase objetivo
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Enfermedades infecciosas cardiovasculares Metabolismo/Diabetes EHNA/Fibrosis Neurociencia Enfermedades raras
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo
Order Guidelines
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Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
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