Revvity, 64PDGPEH, kit de detección de HTRF humano y murino de fosfo-PDGFR-β (receptor beta de PDGF) (Tyr751), 10 000 puntos de ensayo

Descripción general
El ensayo Phospho-PDGFRß (Tyr751) permite la detección cuantitativa de la modulación del receptor beta del factor de crecimiento derivado de plaquetas, fosforilado en la tirosina 751. El PDGFR beta emite señales y se comunica a través de las vías PI3K/AKT y Ras/Raf MAPK. Este receptor de tirosina quinasa de superficie celular asegura la unión de factores de crecimiento específicos, que desencadenan la vía MAPK, lo que conduce a la proliferación celular, la diferenciación celular y la angiogénesis. Al activarse, el PDGFR beta forma un dímero y se fosforila, lo que convierte al ensayo phospho-PDGFRß en una herramienta valiosa en la investigación oncológica.
Cómo funciona
Principio del ensayo de fosfo-PDGFRß (Tyr751)
El ensayo Fosfo-PDGFRß (Tyr751) mide el PDGFRß cuando se fosforila en Tyr751. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Fosfo-PDGFRß (Tyr751) utiliza dos anticuerpos marcados: uno con un fluoróforo donante y el otro con un aceptor.

El primer anticuerpo se selecciona por su unión específica al motivo fosforilado de la proteína, mientras que el segundo, por su capacidad de reconocer la proteína independientemente de su estado de fosforilación. La fosforilación de la proteína permite la formación de un inmunocomplejo que involucra a ambos anticuerpos marcados y que acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de proteína fosforilada presente en la muestra y permite evaluar el estado de fosforilación de las proteínas mediante un ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de 2 placas de fosfo-PDGFRß (Tyr751)
El protocolo de 2 placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, a continuación, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección HTRF de fosfo-PDGFRß (Tyr751). Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de 1 placa de fosfo-PDGFRß (Tyr751)
La detección de PDGFRß fosforilado (Tyr751) con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 2, tampón de lisis 3, tampón de lisis 4, tampón de lisis 5
Modificación molecular-fosforilación
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: ratón humano
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Enfermedades infecciosas cardiovasculares, metabolismo/diabetes, esteatohepatitis no alcohólica (EHNA)/fibrosis, oncología e inflamación, enfermedades raras.
Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo