Revvity, 64PLCG2TPEG, kit de detección de PLC-γ2 total humana HTRF, 500 puntos de ensayo

Descripción general
Este ensayo basado en células HTRF detecta de forma cómoda y precisa la proteína fosfolipasa C gamma 2 (PLCgamma 2).
La PLCgamma 2 es una fosfolipasa específica de fosfoinosítidos que genera segundos mensajeros y desempeña un papel crucial en la transducción de señales, especialmente en células hematopoyéticas como los linfocitos B, mastocitos, macrófagos, linfocitos citolíticos naturales y plaquetas. Tras la estimulación de diferentes receptores, como el receptor de antígeno de linfocitos B (BCR) y los receptores Fc (FcR), la PLCgamma 2 interactúa con diversas proteínas adaptadoras y es fosforilada por tirosina quinasas intracelulares. La fosforilación incluye varios sitios, uno de los cuales es Tyr1217.
La PLCgamma 2 se ha relacionado con diversas patologías como enfermedades autoinmunes e inflamatorias, resistencia a fármacos en el cáncer y neurodegeneración.
Cómo funciona
Principio del ensayo de PLCg2 total
El ensayo Total PLCg2 cuantifica el nivel de expresión de PLCg2 en un lisado celular. A diferencia del Western Blot, este ensayo se basa completamente en placa y no requiere geles, electroforesis ni transferencia. El ensayo Total-PLCg2 utiliza dos anticuerpos marcados, uno acoplado a un fluoróforo donante y el otro a un aceptor. Ambos anticuerpos son altamente específicos para un epítopo específico de la proteína. En presencia de PLCg2 en un extracto celular, la adición de estos conjugados acerca el fluoróforo donante al aceptor, generando así una señal de FRET. Su intensidad es directamente proporcional a la concentración de la proteína presente en la muestra y permite evaluar la expresión de la proteína en un formato de ensayo sin lavado.

Protocolo de ensayo de dos placas de Total-PLCg2
El protocolo de dos placas consiste en cultivar las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis y, posteriormente, transferir los lisados ​​a una placa de detección de bajo volumen de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Total-PLCg2 HTRF. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células.

Protocolo de ensayo de una placa de Total-PLCg2
La detección de PLCg2 total con reactivos HTRF se puede realizar en una sola placa utilizada para cultivo, estimulación y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo una calidad HTRF robusta. Aplicación: Señalización celular.
Marca-HTRF
Modalidad de detección-HTRF
Compatibilidad del tampón de lisis: tampón de lisis 1, tampón de lisis 4, tampón de lisis 5
Modificación molecular total
Kit de grupo de productos
Volumen de muestra: 16 µL
Condiciones de envío - Envío en hielo seco
Clase objetivo: fosfoproteínas
Especie objetivo: humanos
Tecnología-TR-FRET
Área terapéutica - Neurociencia Oncología e Inflamación
Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo